PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 13:37:26
PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有

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PCR产物为什么会出现100~200bp的条带
我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有很明显的条带,共两条,类似于RNA,但从1.5ml的液体培养基中只取了3ul菌液进行菌落PCR,原菌中所带来的RNA应该不多,且PCR105℃的热盖也应将RNA降解掉了.200bp条带为何物,是如何来的?

PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有
你的目的片段长度为500bp,而你的电泳图谱显示是750bp;你对电泳图谱750bp的片段是认可的,也就是说除去目的片段500bp,还有150bp的引物及其他序列;而你的杂带大小平均恰好是150bp,也就是除去150bp的引物及其他序列,应该不含有其他的DNA序列,因此判断你的150bp的条带就是引物二聚体造成的,如果条带非常亮的话,可以考虑减少引物的加入量.

可能是引物多聚物吧。。
可以适量减少引物的量试试

引模二聚体 做PCR都会有的

也碰到了这种情况,搞得很是纠结你后来是怎么解决的?分享一下,谢谢

PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 PCR产物小于100bp是什么原因?为什么我希望得到300bp的PCR产物,却得到小于100bp的片段呢? 请问测序结果为什么前面200bp没有杂峰,而后面却出现很多杂峰?我送的是经纯化的PCR产物. pcr扩增为什么会出现平台期 为什么荧光定量PCR产物长度最好不要超过300bp?产物越长一次循环激发的荧光就越多,达到荧光阈值需要的循环数就越少,那么CT值应该是出现过早吧? PCR产物测序问题用PCR产物直接测序,PCR产物是1200bp左右,但是测出来只有1000bp,请问为什么少了这么多序列呢,我是新手,刚开始做,很多不懂得,望请指教, 荧光定量PCR引物设计为什么要在100-200bp之间 PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来 为什么PCR产物总在2000bp以上我设计的产物是1000BP左右 但是是简并引物 为什么每次跑出来的产物是2000BP以上呢? 为什么质粒与PCR产物一同跑电泳,质粒会比PCR产物跑的快呢?质粒是用水溶的 PCR产物作为模板继续PCR反应,稀释前后产物不同,怎么回事?A、B均为一次PCR产物 再次PCR的条带,A为直接一次PCR产物作为模板,B为稀释100倍后.图中mark为DL10000,一次PCR产物大小1400bp,A的条带与模板大 基因组DNA扩增PCR时为什么会出现两个条带 PCR产物酶切遇到的问题选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG 39 75 C C/AGG…… C C/TGG……pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不 小片段DNA(100-200bp)的PCR扩增PCR模板是100bp-200bp的片段,用SSR引物扩增的时候,出现的不是单一的目的带,目的带出现的同时还有许多非特异性扩增条带,有时候就是条带扩不出来,对于小片段模板 PCR产物跑电泳为什么跑不出孔, 为什么PCR产物末端有A? PCR的引物二聚体怎么判断PCR产物电泳,在100到250BP之间有一条亮的带.这是不是引物二聚体.两条引物是19和20BP 为什么PCR要到第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段