做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/08 12:40:47
做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不

做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不
做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.
我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不高,跑出了多个条带,看怎么让条带跑的更特异些.

做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不
两个策略:1.提高退火温度;2.降低镁离子浓度.如果还不行就两个同时进行.

有专门做梯度pcr的pcr仪,梯度为1°C.
PS:Tm值不是上下引物平均值-5吗?