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来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 14:33:35
sds page 跑蛋白的菌液处理?(具体见说明,请勿复制)(1)6000rpm离心10min,弃上清(2)加入上样缓冲液 or loading buffer(两个是一样的?加入多少?),100摄氏度 10min.(3)1000rpm离心2min,上清加样(加

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sds page 跑蛋白的菌液处理?(具体见说明,请勿复制)
(1)6000rpm离心10min,弃上清
(2)加入上样缓冲液 or loading buffer(两个是一样的?加入多少?),100摄氏度 10min.
(3)1000rpm离心2min,上清加样(加多少?0.75mm的板,),
总结,是不是菌液加的就只有上样缓冲液 or loading buffer?然后一个孔是加maker,多的加上样缓冲液
请勿复制,

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marker看你买的是什么样的,有的还是粉末状呢,那个用水溶解后也需要加loading buffer沸水浴处理的.不过现在卖的很多都是那种直接点样的.说明书一般都有说的,一般10微升.
loading buffer就是上样缓冲液的英文.
另外,你的实验步骤里面,你打错了,第三步是10000rpm*2min,我非常肯定这个步骤一定是高速离心.
第一个步骤,我们一般取1ml菌液离心10000rpm*5min吧,具体记得不太清楚了.然后加loading buffer好像是120微升,1倍的,100微升也OK啦,然后沸水浴5到10分钟,然后高速离心,点样.为了避免串样,维持各点样孔之间的那种压力吧,具体怎么说我记不清楚了,反正就是防止别的孔的样品跑到空白泳道,很难看的.所以在空白处也点上1倍的loading buffer
你按照一个固定的数字做下来,点样的时候开始要摸索一下,多点几个样,看看点多少微升合适,因为你的菌液浓度什么的我们也不知道.你要有条件,可以给蛋白定量,因为跑电泳蛋白浓度过高会很难看,浓度低了看不清楚.

我来回答吧 上样缓冲液 or loading buffer这个就是是一样的,收集完菌体就只加这个就行
loading buffer加多少都是自己定的 看你的菌体有多少 一般你要是3 4 ml菌液离心后的菌体加30-50ul就行
你光说板的厚度了 没说梳子大小啊 一般上15-30ul吧 看你梳子了 不要上太多 梳子小的话10ul也可以
看到最后我明白了 你的梳子是...

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我来回答吧 上样缓冲液 or loading buffer这个就是是一样的,收集完菌体就只加这个就行
loading buffer加多少都是自己定的 看你的菌体有多少 一般你要是3 4 ml菌液离心后的菌体加30-50ul就行
你光说板的厚度了 没说梳子大小啊 一般上15-30ul吧 看你梳子了 不要上太多 梳子小的话10ul也可以
看到最后我明白了 你的梳子是那种只有两个孔的那种,一个小的一个大的,那你上扬上多少要看你的梳子能装多少了 你问的太抽象了

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