PCR,RT-PCR,GAPDH.real time之间的联系.

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/30 05:57:44
PCR,RT-PCR,GAPDH.real time之间的联系.

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看来是做RT-PCR的,
PCR是聚合酶链式反应,也就是体外特异性扩增DNA片段,是所有PCR技术的基础；
RT-PCR有2种理解,即反转录RCR（reverse transcription PCR,以RNA为模板扩增DNA）或实时PCR（real time PCR）,很显然,您指的是后者.real time PCR是定量PCR的一种,以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析,也就是分析模板中特定核酸（RNA或DNA）的量.
现在的real time PCR往往 与 reverse transcription PCR 相结合,能用微量的RNA来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因.那么,这个时候GAPDH就派上用场了,GAPDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶的缩写,这个酶的基因是看家基因,也就是在机体各组织中的表达都趋于稳定和接近,类似的还有actin蛋白,可以作为RT-PCR的内参,也就是衡量模板取样量的一个参照物.
比如,在做某一基因的RT-PCR时,脑部组织和肌肉组织中该基因的拷贝数一致,但发现在该实验组脑部组织GAPDH的量明显更多,就说明在模板取样时,脑部组织细胞取的更多,反推该基因在脑部的表达水平是低于肌肉组织的.往往我们在做RT-PCR时,需要调整,使各实验组细胞取样量一致,也就是GAPDH在实验中表现为扩增量一致,这样更便于比较目的基因的表达水平.
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