western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 05:02:16
western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么?

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western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么?

western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么?
理论上来说是可以的,网上也看到有网友声称自己这样做过.但是不同种一抗是否兼容不相互影响,各自应该加多少量这些条件都需要特别摸索优化.优化过程本身,包括了分别单独做每个一抗,确认在不受干扰条件下该抗体在特定样本中得到的条带究竟在什么位置,有哪些背景.
所以除非这个实验1.对楼主来说是要大量进行,重复进行的,摸清条件就可以大规模应用了;或者2.楼主样本太过珍惜,得到的量无法做足够多个western blot实验,必须在一张膜上得到尽可能多抗体的结果,否则算上优化用的精力和费用,一般不值得做.

如果你的一抗都很特异的话,是可以的。而且最好都是同一种溶液配的,比如都是牛奶或者BSA

western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么? western blot 一抗孵育,为什么不可以将一抗和分析的蛋白样品一起先孵育,后page 电泳,这样更节约一抗? western blot中,封闭液封闭完成后,需要用PBS或PBST洗涤滤膜,然后进行一抗孵育,在一抗孵育完成后为什么要清洗滤膜上的磷酸盐,磷酸盐对后续的加入二抗有什么影响?一抗孵育完成后,我是知道洗 做western blot 的一抗孵育的原理是什么啊?如具体的分子机理,不同的蛋白质又如何选择一抗的?而一抗怎么识别蛋白的? western blot的一抗和二抗是如何作用的? western blot 抗体孵育盒哪里有卖 western blot 封闭液中直接加一抗孵育可以吗? western blot显影问题做western 的时候,HPR标记的二抗孵育一小时,洗膜,先用1:3的ECL发光,荧光比较强.重新pbst洗膜后换用1:1的ECL去显影就没有荧光也显不出来了是怎么回事.重复了好多次都这样,换高 western blot的具体步骤? western blot 的目的 做western blot 的时候怎样选择抗体浓度? western blot中选择什么厂家的一抗比较好,根据什么选择的? Western Blot实验中叠氮钠的作用是什么?如果多次加一抗,如何洗净前面的一抗? western blot的一抗、二抗可以重复用么?一般可以用几次? 求一Foxp3的 western blot 的结果.电泳图 western blot marker的作用? western blot 转膜之后用丽春红进行染色,可以看到条带都转过去了~但是最后做不出来~室温封闭两个小时,一抗1:600孵育过夜,二抗室温一个半小时,一抗二抗用斑点杂交验证过了效价没问题,一抗 western blot 可提前多久制胶,制好的胶可保存多久