western-blot胶不凝固是什么原因啊以前做western胶一般二三十分钟就凝了 ,有半年没做了,着这两天又开始做,但胶很久都不凝,两三个小时都还不凝,想肯定哪个试剂除了问题,但什么都换过了,还是

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/14 13:59:58
western-blot胶不凝固是什么原因啊以前做western胶一般二三十分钟就凝了 ,有半年没做了,着这两天又开始做,但胶很久都不凝,两三个小时都还不凝,想肯定哪个试剂除了问题,但什么都换过了,还是

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western-blot胶不凝固是什么原因啊
以前做western胶一般二三十分钟就凝了 ,有半年没做了,着这两天又开始做,但胶很久都不凝,两三个小时都还不凝,想肯定哪个试剂除了问题,但什么都换过了,还是不凝.真不知道是什么原因,想买现成的胶用过内又没卖的 ,真是郁闷啊,请各位支支招.

western-blot胶不凝固是什么原因啊以前做western胶一般二三十分钟就凝了 ,有半年没做了,着这两天又开始做,但胶很久都不凝,两三个小时都还不凝,想肯定哪个试剂除了问题,但什么都换过了,还是
APS出问题的可能性最大,建议重新买一点APS. 其它的试剂都比较稳定的.

1,复查一遍浓缩胶,分离胶各buffer的组分是否配制有误,特别是pH,现在气温上升,原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多,建议复查,如果pH不对,重新配过。一般情况下,对于pH有要求的溶液,季节更换的时候,基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液,在稀释用作工作液的时候,也要特别注意pH
2,多加过硫酸铵试试,确认是否失效,AP最好是现用现配,至少要放在4℃保存,一周之后也...

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1,复查一遍浓缩胶,分离胶各buffer的组分是否配制有误,特别是pH,现在气温上升,原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多,建议复查,如果pH不对,重新配过。一般情况下,对于pH有要求的溶液,季节更换的时候,基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液,在稀释用作工作液的时候,也要特别注意pH
2,多加过硫酸铵试试,确认是否失效,AP最好是现用现配,至少要放在4℃保存,一周之后也必须新配
3,多加点TEMED,可加速凝固,加二倍量试
4,配好胶后放在温箱里凝的快些。也许你在空调房里做胶温度比较低。

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